Martinotti S, Mazzucco L, Balbo V, Patrone M, Mozzati M, Ranzato E, Burlando B1.
Автореферат
Обогащенная тромбоцитами плазма (PRP) широко применяется для стимуляции восстановления тканей и ускорения остеогенеза, однако единого мнения в отношении механизма ее действия не существует. Корригирующее влияние PRP на модель SaOs-2 остеобластов in vitro было исследовано при помощи анализа подвижности/хемоаттракции клеток и анализа остеогенеза/минерализации, а также при помощи ряда геномных маркеров остеогенеза/остеокластогенеза. Результаты измерения миграции клеток методом зарастания царапины свидетельствуют о том, что PRP стимулирует подвижность клеток, а в ходе проведения анализа с применением мембран-вставок системы «Трансвелл» была выявлена выраженная хемоаттракция. Тесты со щелочной фосфатазой (ЩФ) и ализариновым красным С показали, что PRP слабо, но существенно с точки зрения статистики, стимулирует активность ЩФ и процесс минерализации. SB431542, ингибитор TGF-β, купировал эти процессы и способствовал их регрессированию, что свидетельствует о важности той роли, которую играет вырабатываемый PRP TGF-β1. Анализ экспрессии генов, осуществленный при помощи количественной ПЦР в реальном времени, выявил повышение экспрессии генов остеокальцина, остеопонтина, остеопротегерина, рецептора, активирующего фактор транскрипции NFkB (RANK), и фактора транскрипции 2, содержащего домен Runt (RUNX2). При применении SB431542 уровни экспрессии остеопротегерина и RANK возвращались к исходным значениям полностью, а уровни экспрессии остеокальцина, остеопонтина и RUNX2 - частично. ПЦР с использованием системы панелей генов выявила повышение экспрессии гена катепсина К. Полученные данные свидетельствуют о том, что PRP способствует формированию смешанных остеогенных/остеокластогенных фенотипических особенностей в модели SaOS-2. Подобная реакция может быть использована при наличии резорбции костной ткани in vivo и способствовать ее восстановлению после хирургического вмешательства или после травм.